摘要:【目的】探究在盐度3下氨氮慢性胁迫对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)氨代谢和细胞凋亡的影响,以期为凡纳滨对虾免疫机理研究和生产实践指导提供参考资料。【方法】将480尾初始体质量6.49±0.14g的凡纳滨对虾分为4个组,6个平行,暴露于0(对照组)、0.9、5.2和12.0mg/L浓度的氨氮水体中,氨氮胁迫20d和40d后分别统计凡纳滨对虾体质量增长率和存活率,测定凡纳滨对虾血淋巴和肝胰腺中氨代谢相关物质和酶活性、抗氧化相关酶活性及细胞凋亡相关基因表达量,同时取肝胰腺制作石蜡切片进行Tunnel染色。【结果】随氨氮浓度增加,体质量增长率和存活率逐渐降低;血淋巴氨氮和尿素氮含量与上述呈相反趋势,20d与40d结果相近;肝胰腺谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷氨酰胺合成酶(GS)和过氧化氢酶(CAT)活性在20d升高,在40d 5.2和12mg/L组酶活性降低;氨氮胁迫20d,肝胰腺总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性12mg/L组显著低于对照组(P<0.05);肝胰腺Cyt C和Caspase-3表达量各胁迫组显著高于对照组(P<0.05)。TUNEL检测结果显示,细胞凋亡数量随氨氮浓度增加而增加,且40d较20d更多。【结论】经过氨氮慢性胁迫后,环境氨氮扩散到血淋巴中,尿素氮含量随氨氮浓度增加而增加,而随时间变化不明显;当氨氮浓度高于5.2mg/L时,肝胰腺谷氨酰胺合成途径在胁迫40d后受到抑制,氨代谢受到阻碍,应激产生的活性氧超出抗氧化系统调节范围,对肝胰腺造成损伤,诱导细胞凋亡发生,对凡纳滨对虾生长存活造成不利影响。
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