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关岭牛MEF2A与MEF2B基因克隆及组织表达特征分析
作者: 孙金魁  许厚强  
单位:
关键词: 关岭牛  MEF2A基因  MEF2B基因  组织表达  
分类号:
摘要:

摘要:【目的】通过分析肌肉生长因子MEF2A、MEF2B的生物学信息特征及在关岭牛不同发育阶段各组织器官中的表达量,对关岭牛的肉质和生长特征提供初步的理论支撑。【方法】利用RT-PCR克隆出MEF2A(GenBank No.NM_001083638.2)、MEF2B(GenBank No.NM_001145793.1)基因CDS区并测序验证,运用生物信息学在线软件对两个基因进行蛋白结构预测和功能分析。同时采用实时荧光定量PCR检测MEF2A和MEF2B基因在关岭牛的犊牛、青年牛和成年牛三个阶段各组织器官中mRNA水平。【结果】RT-PCR成功克隆牛MEF2A和MEF2B基因CDS区序列,分别编码492和368个氨基酸;MEF2A和MEF2B蛋白相对分子质量约为52和39 kD,理论等电点分别为9.34和10.00,皆属于不稳定蛋白。蛋白二级结构和三级分析结果表明,牛MEF2A与MEF2B主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,主要定位于细胞质;遗传进化分析得知,牛MEF2A基因与挪威鼠同源性最高,MEF2B基因与绵羊同源性最高。qRT-PCR结果显示,MEF2A基因在犊牛阶段的肺脏中表达程度最高;在青年牛和成年牛心脏中表达量极显著高于其他组织。MEF2B基因在犊牛肾脏中表达量最高,极显著高于其他组织;在青年牛肺脏表达量极显著高于其他组织,其次是肾脏;成年牛脾脏中表达量极显著高于其他组织,在肝脏和脾脏中,MEF2A与MEF2B基因随关岭牛年龄变化分别呈负相关与正相关。【结论】MEF2A基因在关岭牛不同发育阶段心脏中表达相对较高,MEF2B基因在关岭牛不同发育阶段肺脏、脾脏中表达相对较高,两基因均在关岭牛不同发育阶段里脊中表达相对较低,该结论进一步完善了MEF2A、MEF2B基因对关岭牛生长发育的影响。

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