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点带石斑鱼脑和视网膜中神经型一氧化氮合成酶的分布与定位
作者: 白帆  孙敬锋  
单位: 天津农学院  天津农学院  
关键词: 点带石斑鱼 神经型一氧化氮合成酶 免疫组织化学 NADPH-d 蛋白免疫印迹  
分类号:
摘要:

【目的】研究点带石斑鱼脑和视网膜中一氧化氮(NO)含量、神经型一氧化氮合成酶(nNOS)的分布及活性,为进一步揭示这些组织中NO的生理功能提供形态学资料。【方法】利用NADPH-d组织化学染色法、免疫组织化学法、化学比浊法、蛋白免疫印迹技术及Griess试剂法对点带石斑鱼脑组织和视网膜中nNOS的分布与活性及其蛋白分子量和NO含量进行研究。【结果】NADPH-d组织化学染色后,一氧化氮合成酶(NOS)阳性物质为蓝色。在大脑中,NOS阳性物质位于神经元和神经纤维;在小脑中,NOS分布于颗粒层的颗粒细胞、分子层的神经纤维和浦肯野细胞层的浦肯野细胞;在视网膜中,NOS分布于色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。免疫组织化学染色后,nNOS阳性物质为深棕色。在大脑中,nNOS存在于神经元和神经纤维;在小脑中,nNOS分布在颗粒层、分子层和浦肯野细胞层;在视网膜中,nNOS分布在色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层、视神经纤维层。蛋白免疫印迹试验结果显示,脑组织和视网膜中nNOS在显色后的硝酸纤维素膜上均出现三条蛋白免疫印迹条带,其对应分子量分别为130 kD、120 kD和80 kD。NO含量在脑组织和视网膜中分别为17.601 ± 1.743 μmol/L和13.624 ± 1.249 μmol/L,nNOS活性在脑组织和视网膜中分别为38.070 ± 3.047 U/mgprot和23.748 ± 2.860 U/mgprot。【结论】点带石斑鱼脑组织和视网膜中均存在nNOS,推测nNOS可能在点带石斑鱼脑神经及视神经系统生理活动中发挥重要作用。脑中NO含量和nNOS活性均显著高于视网膜,推测是因为脑是重要的中枢神经,对机体生理功能起到重要的调节作用。

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