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大珠母贝组织蛋白酶B基因的克隆及组织表达分析
作者: 徐扬  杨创业  
单位: 广东海洋大学  广东海洋大学  
关键词: 大珠母贝  组织蛋白酶B  基因克隆  组织表达  实时荧光定量  
分类号:
摘要:

【目的】克隆大珠母贝(Pinctada maxima)组织蛋白酶B(Cathepsin B,CatB)基因,分析该基因在大珠母贝不同组织中的表达模式。【方法】本研究利用RACE技术克隆大珠母贝CatB基因(PmCatB),并利用实时荧光定量PCR分析该基因在外套膜套膜区、边缘膜区、中央膜区、鳃、肝胰腺、闭壳肌和足7个组织中的表达模式。【结果】结果显示:PmCatB基因长度为1365 bp,开放阅读框(ORF)1026 bp,编码341个氨基酸,5′UTR长度为81 bp,3′UTR长度为258 bp。预测 PmCatB分子质量约为37.73 kDa,理论等电点为6.6。该基因推导的氨基酸序列含有一个Pept_C1结构域。大珠母贝CatB与其他物种CatB的同源性为 61.24%~90.91%,与马氏珠母贝(Pinctada fucata)CatB的同源性最高。PmCatB与马氏珠母贝CatB的亲缘关系最近。PmCatB在大珠母贝检测的7个组织中均有表达,在肝胰腺中显著高表达(P<0.05)。【结论】PmCatB 在大珠母贝肝胰腺中高表达,说明PmCatB可能通过参与大珠母贝消化吸收作用参与其生长代谢过程,为进一步探究大珠母贝生长代谢调节机理提供基础资料。

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