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光裸星虫CyclinB克隆及在卵母细胞中的表达分析
作者: 邬婧  王庆恒  苏泳霖  周丹  钟如卓  郭志诚  
单位:
关键词: 光裸星虫  细胞周期蛋白B  表达分析  卵母细胞  
分类号:
摘要:

摘要:【目的】细胞周期蛋白B(CyclinB)是细胞从G2到M期转化的重要调控因子,了解CyclinB在光裸星虫卵母细胞发育过程中的作用,为进一步探究星虫卵母细胞发育的分子机制提供基础材料。【方法】利用RACE技术克隆了光裸星虫CyclinB cDNA全长并对其进行生物信息学分析,利用qRT-PCR技术分析CyclinB在卵母细胞中的表达模式。【结果】研究结果显示,Sn-CyclinB全长为2468bp,编码409个氨基酸,具有CyclinB特征序列(FLRRxSK)和Cyclin降解框(RxALGxIxN),在较长的3’UTR(1097bp)中含有CPE、TCE和K box翻译调控元件;Sn-CyclinB蛋白理论分子量为46.304KDa,等电点为8.68,属于亲水性蛋白,含有周期蛋白框(Cyclin box);多序列对比发现CyclinB同源蛋白N端的保守性较弱;系统进化树分析表明光裸星虫等无脊椎动物和脊椎动物的CyclinB分别聚为两大支。表达模式分析表明Sn-CyclinB在不同发育时期的卵母细胞中表达量差异显著(P<0.05),峰值分别在卵黄旺盛合成后期(O3)和肾管发育时期(O5)。【结论】Sn-CyclinB具有B型周期蛋白的特征序列,其3’UTR含有多种与翻译调控相关的调控元件,根据表达模式推测Sn-CyclinB可能参与了光裸星虫卵母细胞减数分裂G1/S期和G2/M期的转换。

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