<<登录旧系统审稿   登录新系统审稿>>

建议您登录自己的邮箱点击审稿链接进入审稿系统 ×
首页 学报新闻 学报概况 编委会 专家库 学术影响 投稿指南 审核流程 标准规范 下载专区 投诉邮箱 联系我们 EngLish

正文 您当前的位置:首页》正文

松材线虫效应蛋白Bx-FAR-1的原核表达与活性测定
作者: 李煜  吴小芹  
单位:
关键词: 松材线虫  效应蛋白  原核表达  蛋白纯化  
分类号:
摘要:

【目的】纯化获得松材线虫效应蛋白Bx-FAR-1,并验证其体外活性,为后续在蛋白水平进一步研究效应蛋白Bx-FAR-1在松材线虫致病过程中的作用提供基础。【方法】利用原核表达系统诱导并纯化获得大量效应蛋白Bx-FAR-1,通过本氏烟瞬时表达实验验证其蛋白活性。【结果】利用特异性引物,成功从松材线虫cDNA中扩增出Bx-FAR-1基因(BXY_1685000.1);通过同源重组成功将目的基因连接到表达载体pET-32a上,并转化至大肠杆菌BL21表达感受态进行后续的诱导表达和纯化。设置3种条件进行重组蛋白诱导,当诱导条件为15℃,150r/min诱导16h时,重组蛋白以可溶性形式表达,且蛋白表达量高。将纯化获得的Bx-FAR-1蛋白以不同浓度水平在烟草上进行瞬时表达实验,当蛋白浓度浓度达到100nM可显著抑制致病疫霉的IFN1引起的烟草细胞坏死。【结论】原核表达系统可以成功诱导表达并纯化得到松材线虫效应蛋白Bx-FAR-1;效应蛋白Bx-FAR-1可以抑制致病疫霉的IFN1引起的烟草细胞坏死,说明Bx-FAR-1可以抑制寄主免疫,后续可利用纯蛋白进一步验证其在松材线虫致病中的作用。

基金项目:
参考文献:
总浏览数: 9 3 5 3 4 9 9  今日总人数: 9 9 6 4 2
主办:广西农业科学院    地址:广西南宁市大学东路174号   邮政编码:530007
电话:(+86)-771-3243905; (+86)-771-3244920   电子邮箱:nfnyxb@163.com
Copyright © 2011 Nfnyxb.com, All Rights Reserved  版权所有©2011《南方农业学报》编辑部   
 本系统由北京博思汇文数字科技有限公司设计开发 技术服务电话:400-921-9838

;