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多鳞鱚vhl基因克隆及其低氧胁迫的mRNA表达
作者: 林星桦  潘炎杨  陈芳圆  黄志棚  黄洋  杜涛  朱春华  李广丽  田昌绪  
单位: 广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  广东海洋大学水产学院  
关键词: 多鳞鱚  vhl基因  低氧胁迫  基因分析  
分类号:
摘要:

【目的】克隆多鳞鱚vhl基因并分析其组织分布及在低氧胁迫处理后的表达变化,为后续研究vhl功能和多鳞鱚低氧胁迫遗传机制提供参考依据。【方法】采用PCR扩增技术克隆多鳞鱚vhl基因cDNA全长序列,利用生物信息学分析软件对多鳞鱚vhl基因序列进行分析,并以实时荧光定量PCR分析vhl基因在多鳞鱚不同低氧胁迫和复氧处理前后鳃和心脏组织的表达变化。【结果】多鳞鱚vhl基因cDNA序列全长727 bp,包括504 bp的开放阅读框,编码167个氨基酸。氨基酸序列比对结果显示,多鳞鱚vhl与盲曹鱼同源性最高(81%);系统进化结果显示多鳞鱚与攀鲈亲缘关系最近。vhl在多鳞鱚主要组织中均有表达,在鳃、精巢和卵巢组织中表达最高,肝脏和心脏组织次之。荧光定量PCR分析了低氧胁迫前后vhl基因在鳃和心脏组织中mRNA表达情况,结果显示,低氧处理1小时后,vhl基因在心脏和鳃组织中表达量显著上升 (P<0.05);低氧处理6小时后,vhl基因在鳃组织中无显著变化 (P>0.05),在心脏组织显著上升(P<0.05);恢复氧气4小时后,vhl基因在鳃组织仍中无显著变化 (P>0.05),在心脏组织显著下降(P<0.05)。【结论】vhl基因在低氧胁迫后表达量显著提升,说明在多鳞鱚中,vhl基因在低氧应答通路中扮演重要角色。

基金项目:
参考文献:
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