【目的】研究马铃薯叶片内生细菌对马铃薯块茎蛾幼虫的杀虫活性，为马铃薯块茎蛾生物防治提供理论依据。【方法】以云南省2种马铃薯主栽品种丽薯6号和会-2叶片为材料，采用LB固体培养基分离培养马铃薯叶片内生细菌，根据内生细菌的形态特征和16S rDNA序列进行种类鉴定；通过浸叶饲喂法测定内生细菌的发酵液、发酵上清液和菌悬液对马铃薯块茎蛾3龄幼虫的毒力。【结果】分别从丽薯6号和会-2叶片中分离获得对马铃薯块茎蛾3龄幼虫具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）QL1和带化红球菌（Rhodococcus fascians）YH2。分别用浓度为1.5×109 CFU/mL的菌株QL1和YH2发酵液饲喂马铃薯块茎蛾3龄幼虫后第7 d时，其幼虫累积死亡率分别为81.67%和65.00%，LT50分别为3.03和5.58 d；菌株QL1发酵液处理后第3、5和7 d马铃薯块茎蛾3龄幼虫的LC50分别为7.99×108、3.21×106和2.73×103 CFU/mL；菌株YH2菌体无明显致死效应。在1.5×109 CFU/mL浓度下，菌株QL1和YH2发酵液对马铃薯块茎蛾3龄幼虫的杀虫活性高于发酵上清液和菌悬液。菌株QL1和YH2的发酵液、发酵上清液、菌悬液处理后马铃薯块茎蛾3龄幼虫的累积死亡率均随着处理时间变长而逐渐升高。【结论】马铃薯叶片内生细菌苏云金芽孢杆菌菌株QL1和带化红球菌菌株YH2的发酵液、发酵上清液、菌悬液对马铃薯块茎蛾3龄幼虫均具有杀虫活性，可作为马铃薯块茎蛾生防制剂开发的潜力菌株。