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高产胞外多糖海洋芽孢杆菌分离鉴定及其多糖抗肿瘤活性分析
作者: 李尚泉  陈 佳  何秀苗*  
单位: (1广西民族大学海洋与生物技术学院/广西多糖材料与改性重点实验室  南宁 530006)  
关键词:
分类号:
出版年,卷(期):页码:2021 ,52 ( 11 ): 页码:3166-3173
摘要:

【目的】明确广西北部湾海洋细菌胞外多糖(EPS)独特的抗肿瘤等生物学活性,为北部湾海域细菌EPS活性研究及开发利用提供参考依据。【方法】采集广西钦州茅尾海红树林浅层土壤样品,使用LB-苯胺蓝培养基及苯酚—硫酸法筛选EPS高产海洋细菌,基于16S rRNA序列进行菌株鉴定;通过高效凝胶渗透色谱和红外光谱测定EPS的分子量及其结构,最后使用噻唑蓝(MTT)法测定EPS对Vero细胞的毒性及抑制HeLa细胞增殖的效果。【结果】筛选出1株EPS产量为0.2917 mg/mL的菌株,命名为QLc-04,在LB-苯胺蓝固体培养基上生长形成的菌落呈白色,不透明,中央略微隆起,表面粗糙,为革兰氏阳性杆菌。QLc-04与芽孢杆菌属(Bacillus)菌株的16S rRNA序列相似性在99.45%~99.82%,其中与B. thuringiensis BT62(CP044978)的相似度最高(99.82%),与B. cereus ATCC 14579T(AE016877)和B. mycoides DSM 2048T(ACMU01000002)相似性均为99.81%;在基于16S rRNA序列相似性构建的系统发育进化树上,QLc-04与芽孢杆菌属聚类为同一分支,因此确定QLc-04为芽孢杆菌属。QLc-04-EPS分子量约179.9 kD,属于具有吡喃型结构的多糖;QLc-04-EPS对Vero细胞无直接毒性,在10~300 μg/mL浓度范围内Vero细胞随QLc-04-EPS浓度的增加其增殖能力不断升高,但QLc-04-EPS浓度超过50 μg/mL时对HeLa细胞增殖的抑制作用显著增强(P<0.05)。【结论】海洋芽孢杆菌QLc-04经发酵培养36 h其EPS产量为0.2917 mg/mL;QLc-04-EPS为典型吡喃型多糖,分子量为179.9 kD,具有显著抑制HeLa细胞增殖的作用。

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